凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),又稱分子排阻色譜法,其分離物質(zhì)的原理為分子篩原理,且多用于分離有機(jī)大分子化合物,如蛋白質(zhì)、多肽、多糖等。
根據(jù)分離的對(duì)象是水溶性的化合物還是有機(jī)溶劑可溶物,又可分為凝膠過(guò)濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。凝膠過(guò)濾色譜一般用于分離水溶性的大分子,如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。凝膠滲透色譜法主要用于有機(jī)溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙/烯、聚氯已烯、聚乙/烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對(duì)分子質(zhì)量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙/烯凝膠,洗脫溶劑為四氫/呋喃等有機(jī)溶劑。
凝膠滲透色譜與凝膠層析基本上是一致的只是固定相存在差異。凝膠層析又稱分子篩過(guò)濾、排阻層析,操作條件比較溫和,可在相當(dāng)廣的溫度范圍下進(jìn)行,并且對(duì)分離成分理化性質(zhì)的保持有獨(dú)到之處。兩者的共同點(diǎn)是都不需要有機(jī)溶劑。凝膠色譜色譜一般用在HPLC等分析場(chǎng)合。而凝膠層析一般用在制備的時(shí)候。
凝膠滲透色譜作為一門新興的科學(xué),隨著各種新型檢測(cè)器的出現(xiàn)(如UV、FT-IR、LS、Viscometer等),它的應(yīng)用范圍也逐步從生物化學(xué)、高分子化學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)等向其它領(lǐng)域滲透,成為化學(xué)領(lǐng)域內(nèi)不可少的分析手段。